Formation - Les outils vectorologiques pour la modification génique en culture cellulaire : théorie et pratique

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Environnement scientifique et technique de la formation

Institut NeuroMyoGène

- UMR 5261

RESPONSABLE

Edwige BELOTTI

Chercheuse

UMR 5261

LIEU

LYON (69)

ORGANISATION

2,5 jours
De 3 à 6 stagiaires

MÉTHODES PÉDAGOGIQUES

Alternance de cours interactifs (2/3 du temps) et de travaux dirigés (1/3 du temps) sous forme d'exercices et d'échanges.
Tout au long de la formation, des exercices corrigés permettront au stagiaire d'évaluer l'acquisition des connaissances.
Un fichier au format PDF sera mis à disposition du stagiaire.

COÛT PÉDAGOGIQUE

1400 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE

24319 : Nous consulter à cfe.contact@cnrs.fr / 01 69 82 44 55

OBJECTIFS

Connaître le cadre réglementaire pour développer de nouvelles lignées cellulaires génétiquement modifiées

Être capable de choisir sa méthode de vectorisation pour dériver une nouvelle lignée cellulaire OGM

Comprendre le système CrispR-Cas9 appliqué à la modification génétique de cellules

Savoir analyser ce qu'il faut maintenir, améliorer ou changer dans sa pratique de la culture cellulaire

PUBLICS

Chercheurs, ingénieurs et techniciens voulant maîtriser la mise en place de lignées cellulaires génétiquement modifiées

Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire téléchargeable ICI devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.

PRÉREQUIS

Avoir une expérience minimale en culture cellulaire

PROGRAMME

Cours :
- Connaitre les notions réglementaires lors de la génération de lignées cellulaires :
. questions de bioéthique
. déclaration de matériel
. niveau de confinement en fonction des risques biologiques
- Aspects théoriques de la fabrication de lignées cellulaires génétiquement modifiées :
. pourquoi modifier une lignée cellulaire ?
. présentation des outils de vectorisation disponibles : transfection, électroporation, infections
. avantages et inconvénients des différentes méthodes
- Application de la technologie Crispr-Cas9 dans la création de nouvelles lignées cellulaires :
- Sélection de population cellulaire polyclonale ou obtention de clone cellulaire
- Avantages et inconvénients de l'utilisation de lignées cellulaires et contrôles qualité

Travaux pratiques :
- Observation au microscope de lignées cellulaires
- Passage de cellules et comptage
- Préparation des cellules et de complexes RNP-Cas9
- Electroporation et remise en culture
- Observation des lignées et conclusions

Chaque stagiaire manipulera des cellules en culture (passage, comptage, préparation des échantillons, observations).

INTERVENANTS

E. Belotti (chercheuse) et V. Risson (ingénieure)

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