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Formation - Production et analyse de protéines recombinantes

Environnement scientifique et technique de la formation

Laboratoire de microbiologie et de génétique moléculaires

- UMR 5100
RESPONSABLE

Kamila BELHABICH-BAUMAS

Ingénieure d'études

UMR 5100

LIEU

TOULOUSE (31)

ORGANISATION

35 h
De 3 à 6 stagiaires

MÉTHODES PÉDAGOGIQUES

17 h 30 cours et 17 h 30 TP
Tout au long de la formation, des cas pratiques ou exercices corrigés permettront à l'apprenant d'évaluer l'acquisition des compétences.

COÛT PÉDAGOGIQUE

1836 Euros

A L'ISSUE DE LA FORMATION

Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE

25229 : du lundi 02/06/2025 au vendredi 06/06/2025 à TOULOUSE

2025
Janvier Février Mars Avril
Mai Juin
25229
Juillet Août
Sept Oct Nov Déc
OBJECTIFS
-

Acquérir les fondamentaux de la biologie moléculaire et de la biochimie des protéines pour produire, extraire et analyser les protéines recombinantes


-

Maîtriser l'utilisation du logiciel Clone Manager pour réussir le clonage et la production de protéines in silico


-

Choisir la méthode appropriée pour détecter les protéines recombinantes

PUBLIC
Ingénieurs, chercheurs et techniciens en biologie, pharmacologie, chimie et/ou biophysique
PRÉREQUIS
Connaissances de base en biologie moléculaire et en génie génétique. Avoir suivi le stage "De la biologie moléculaire au génie génétique : théorie et pratique" ou niveau équivalent
PROGRAMME
Cours (17,5 h)
- De la cellule au gène : rappels sur l'expression d'un gène (transcription, traduction) ; notions de mutations
- Les éléments nécessaires à la surexpression d'un gène : choix du vecteur et choix de la cellule hôte
- Méthodes de fusion de gènes et d'étiquetage de protéines : étiquetage d'un gène dans un vecteur par la méthode des enzymes de restriction, par la méthode "In-Fusion", par recombinaison homologue
- Méthodes de mise en évidence de l'expression génique ou de la production de protéines recombinantes, détections par Western Blot (principe de l'immuno-détection par chimioluminescence, par la phosphatase alcaline (PhoA) et par fluorescence)

Travaux pratiques et dirigés (17,5 h)

- Travaux dirigés sur l'expression génique et sur le clonage en respectant le cadre ouvert de lecture : utilisation du logiciel "Clone Manager V 9"
- Mise en culture des cellules bactériennes en conditions stériles et induction de l'expression d'un gène par l'IPTG
- Extraction des protéines totales, dosages, dépôts sur 2 gels et migration, visualisation des protéines sur 1 gel, transfert des protéines du 2ème gel sur membrane nitrocellulose, visualisation des protéines sur membrane
- Identification
EQUIPEMENTS
Matériel standard d'un laboratoire de biologie moléculaire et de microbiologie
Il est demandé aux stagiaires de venir avec leur propre ordinateur PC (et non pas Mac) portable avec les droits administrateurs afin de pouvoir installer en début de stage les logiciels nécessaires à la formation.
INTERVENANTS
K. Belhabich-Baumas (ingénieure) et S. Marques-Pietro (technicien)